2022年4月13日/医麦客新闻 eMedClub News/--人类免疫缺陷病毒（HIV）目前的常规疗法是抗逆转录病毒疗法（cART）。虽然cART延长了HIV患者的寿命且改善了预后，但这种方法需长期使用，面临着副作用、耐药性等问题；并且，由于HIV会永久整合到宿主基因组中，无法被抗病毒疗法清除，故HIV仍然无法完全治愈。
近日，美国国立卫生研究院（NIH）的研究团队在Nature Medicine上发表了题为Safety and tolerability of AAV8 delivery of a broadly neutralizing antibody in adults living with HIV: a phase 1, dose-escalation trial的研究论文。该研究对8名感染了HIV的患者进行AAV病毒介导的基因治疗，通过AAV病毒递送编码强效广泛中和抗体（bnAbs）的DNA，能够在体内长效产生广泛中和抗体，为艾滋病等疾病治疗带来新的有力工具。这也是首次通过AAV递送在人体内产生单克隆抗体。这也表明诱导产生bnAbs是预防和治疗艾滋病的利器。
HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒，进入人体后它会大量破坏人体免疫系统中最重要的CD4+T细胞，之后经过数年或更长的潜伏期后使人体丧失免疫功能，进而发展成艾滋病患者。患者通常因抵抗力极度下降然后出现多种感染，后期常常发生恶性肿瘤，以至全身衰竭而死亡。据联合国艾滋病规划署数据，目前全球范围内现存HIV携带者和艾滋病患者人数高达3800万人，且数量仍在快速增长中。
此次研究该研究团队共招募了8名感染了HIV的患者，此前他们至少接受过3个月的cART治疗。然后他们接受肌肉注射的AAV8递送的广泛中和抗体（AAV8-VRC07）进行治疗，治疗分三个给药剂量：5×10E10vg/kg、5×10E11vg/kg、2.5×10E12vg/kg。
这项1期临床试验的主要终点是评估AAV8-VRC07治疗的安全性、耐受性和确定体内的药代动力学和免疫原性，以及描述患者对 AAV8-VRC07载体及其产物的免疫反应。而次要终点是评估AAV8-VRC07对CD4 T细胞计数和HIV病毒载量的影响，并评估受试者体内产生的广泛中和抗体的持久性。
此次研究结果显示，1-3年随访期间，患者CD4 T细胞计数或病毒载量未发生临床显著变化。8名患者在注射后第6周和第52周时广泛中和抗体都有增加，且8名患者都产生了可测量的血清广泛中和抗体。其中有3名患者的最大抗体浓度超过1µg/ml，有4名患者的血清广泛中和抗体浓度在长达3年的随访中接近最大浓度并保持稳定，且体内产生的广泛中和抗体的中和活性与体外产生的活性相似。这表明肌肉注射AAV8-VRC07是安全的且耐受性良好。
▲图片来源：参考资料1
另外，这项研究表明AAV载体可以在体内持久产生具有生物活性、且难以诱导产生的广泛中和抗体，这为抗击艾滋病等传染性疾病增加了新的有力工具。尤为重要的是，这一AAV递送平台能够单次注射长时间产生抗体，可以使用AAV递送任何所需的抗体的编码DNA，从而用于治疗新冠、艾滋病等各种传染性疾病，以及用作其他生物药的递送，以治疗自身免疫病、癌症等。
HIV目前尚无能够彻底治愈的可靠方法。不过，包括基因编辑疗法在内，细胞与基因治疗领域也借助自身优势，在这一赛道不断研发探索，大多尚在临床前阶段。2021年8月，复旦大学朱焕章教授团队在Frontiers in Microbiology上在线发表论文，报道了一种携带PD-1显性负性受体（PD-1 dominant negative Receptor，DNR）且HIV特异性的CAR-T细胞在移植HIV-1 env+/PD-L1+免疫细胞的NCG小鼠模型上显示出体内更强的抗HIV-1功能。这是首次将PD1/PDL1信号通路阻断与CAR-T细胞治疗结合应用于HIV/AIDS治疗的研究，显示出进一步临床转化和开发的潜力，将为HIV-1“功能性治愈”提供了一种新型治疗思路。2021年5月，American Gene Technologies(AGT)宣布其1期临床试验已完成首次患者给药。该临床试验旨在评估细胞基因治疗产品AGT103-T的安全性。AGT103-T富含具有HIV特异性和抗性的CD4 T细胞。AGT的方法旨在修复T辅助细胞缺陷，并提供持久的病毒控制。2020年7月，国内的再生之城提交了抗HIV-1嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）注射液临床申请。该疗法由中山大学张辉教授团队开发，能有效诱导感染HIV-1的CD4 T淋巴细胞的细胞溶解的嵌合抗原受体T细胞（VC-CAR-T），旨在重建可靠的免疫监测，根除重新激活的HIV-1感染细胞，具有功能性治愈艾滋病的潜能。2020年，哈佛大学的研究人员开发一种双重CAR-T疗法，能够增强其杀死感染细胞的能力。由于改造好的CAR-T本身仍具有被HIV感染的风险，为了保护CAR-T细胞免受HIV感染，研究小组添加了C34-CXCR4蛋白，该蛋白可防止HIV附着并感染细胞。尽管如此，还是找到了感染HIV的细胞，但它们可以以某种方式抑制这种病毒，且并不需要治疗。2021年6月，加州大学戴维斯分校的研究团队在JCI Insight期刊上发表论文，利用猿猴免疫缺陷病毒（SIV，相当于人类的HIV）感染的恒河猴模型，对同种异体骨髓来源的间充质干/基质细胞（MSC）治疗HIV的作用进行了研究。研究发现，MSC可以引起SIV病毒减少，增强体内的抗病毒免疫力，并修复淋巴组织中病毒感染早期就受损的重要组织。这项新研究为未来将MSC作为当前HIV治疗手段的辅助疗法，或开发根治HIV的新疗法提供了指引。
2021年6月9日，解放军总医院第五医学中心感染病诊疗与研究中心主任，国家感染性疾病临床医学研究中心主任王福生院士团队在Signal Transduction and Targeted Therapy上在线发表论文，报告了两种剂量的hUC-MSC输注对于治疗免疫无应答的HIV-1患者的耐受性良好。低剂量优于高剂量输血，并且大部分改善了患者的免疫重建，为免疫无应答的HIV-1患者提供了一种与抗逆转录病毒治疗相结合有前景的新治疗方法。2019年9月，邓宏魁团队在NEJM的“Brief Report”栏目在线发表的文章中报告了一例患者的研究数据，结果显示编辑和未编辑细胞的混合干细胞植入受者体内后，达到完全供者细胞嵌合，且在数据截止前仍持续。19个月时，白血病处于缓解期，但患者仍有HIV感染并接受抗逆转录病毒治疗。2021年9月20日，Nature Communications上发表一篇了题为"Exosome-mediated stable epigenetic repression of HIV-1"的研究论文。在研究中，团队开发了一种以锌指蛋白(Zinc Finger Protein, ZFP-362)为靶点的HIV-1启动子。DNA甲基转移酶3a(DNMT3A)等细胞表观遗传库中的蛋白质可以下调HIV-1的转录，而该启动子可融合到DNA甲基转移酶3a的活性区域，以诱导HIV-1的长期稳定表观遗传抑制。为了递送该HIV-1启动子，研究人员就此对细胞进行工程化改造，使其分泌的外泌体能够产生含有编码这种HIV-1抑制蛋白的RNA。2021年9月15日，Excision BioTherapeutics公司宣布，美国FDA已经批准了基于CRISPR的HIV候选疗法EBT-101的IND申请。Excision计划在今年晚些时候启动EBT-101的1/2期首次人体临床试验，以评估EBT-101在1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染者中的安全性、耐受性和疗效。EBT-101是一种基于体内CRISPR基因编辑的治疗药物，旨在切除HIV整合到人类细胞基因组中的前病毒（proviral）DNA。EBT-101采用AAV9包装的CRISPR-Cas9和两种gRNA，靶向HIV基因组内的三个位点，从而切除大部分HIV基因组，以最大限度地减少潜在的病毒逃逸。临床前研究显示，EBT-101在多种细胞系中显示出切除HIV前病毒DNA的能力，包括人类原代细胞，以及非人灵长类在内的多种动物模型。另外，Excision和科学家们也正在探寻EBT-101的联合疗法，以提高免疫系统清除受感染细胞能力。
参考资料：
1.https://www.nature.com/articles/s41591-022-01762-x
声明：本文涉及内容仅用于探究生物医药前沿进展，不构成任何医疗指导，如有需求请前往正规医院就诊。
——近期热门活动一览——
▼4月14日，从原料到自动化解析mRNA药物生产工艺全流程工艺瓶颈及优化考量
▼4月20日，走向GMP生产：mRNA药物制备工艺进展
▼7月1日-3日，上海，2022上海国际生物创新药产业博览会